- 產品描述
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Oroboros O2k 是目前國際認可度很高的一款多樣本能量代謝測量/分析產品
O2k 系統通過高分辨率的極譜氧電極和全功能的熒光技術實現對樣本的線粒體呼吸功能以及生物體的能量代謝進行精準定量及分析。
多功能參數檢測：可同時檢測耗氧率、呼吸速率、呼吸控制比率、PH 值、線粒體膜電位、自由基、ROS、ATP、Ca2+、NO、H2S、TPP+。
多種樣品適用：可用于直接測量線粒體、原代細胞、傳代細胞、組織器官，或者微生物、植物細胞等。
性能特點：
? 雙通道系統/多通道系統
? 測量樣本容量 0.5ml-3.5ml
? 溫度范圍： 4-47 ℃ ， 溫 度 穩 定 性 為0.002℃，可進行低溫試驗
? 具有可變速的磁力攪拌功能
? 極譜氧電極傳感器，檢測氧流量分辨率為 1 pmol O2?s-1?ml-1，穩定狀態下5分鐘內變化不超過 0.5 pmol ? s-1?ml-1
? 熒光檢測單元：雙通道/四通道
? 熒光檢測參數包括：線粒體膜電位 Δψ、ATP、Ca2+、ROS
? 獨立外接電極單元：PH、H2O2、TPP+、H2S 、NO
? 樣品腔為杜蘭玻璃、鈦金屬等極低活性的材質，降低背景氧干擾
? 同步顯示流動氧的濃度；自動進行氧信號的校正。
? 雙通道微量注射泵，具有注射和回抽的功能，自動化控制，可在軟件的編程下進行定時、定量的精準加樣，不限制加樣次數。
? 附有手動加藥系統，配有 15 種不同量程的微型加藥針
? 專用組織勻漿工具，采用勻漿管技術對樣本進行研磨，樣本需求量少至幾毫克。
? 可自由設計實驗，根據實驗設計實時的加入不同的底物、抑制劑等化合物去改變線粒體的呼吸，最多可以加入 20 多種
? 強大的 DatLab 軟件功能：可實時顯示并記錄所有測量參數；可在實驗過程中隨時更改實驗設計；可自動進行氧氣等參數的校準；具有 Protocol 編程功能，支持客戶自定Protocol 程序，方便客戶選用。
Oroboros O2K 技術優勢
高精度電極檢測方法實驗使用試劑開放，無實驗耗材消耗封閉性檢測環境，可進行低氧/常氧/高氧實驗擁有加熱/制冷模塊，可實現電子控溫，溫度精度高精準定量檢測方式，直接檢測樣本消耗 O2 的含量具有攪拌系統的檢測腔，確保腔室內樣本溶液均勻，可提高檢測樣本的準確性和實驗重復性.
應用演示：
實驗目的為探究不同濃度解耦聯劑FCCP 對細胞最大氧耗率 OCR 的影響。細胞經氧化磷酸化抑制劑寡酶素處理后，細胞的耗氧率顯著降低，使細胞呼吸達到 Leak 水平。實驗第 30 分 鐘開始加入 0.5uM FCCP，并每間隔120 秒逐量增加 0.5uM。
實驗數據結果顯示，隨著 FCCP 濃度的不斷增加，細胞耗氧量呈現顯著增加，并且在 FCCP 濃度加入劑量為 5.5uM 時達到最大值，而再增加濃度并不會使細胞耗氧率出現顯著增加，這表明 FCCP 的最佳濃度為 5.5uM。
應用演示：
實驗目的為了解細胞的能量代謝機制。實驗樣本為不同量的人類股外側肌組織，將樣本A3.4mgWw組織與樣本B2.8mgWw組織分別置于雙通道的細胞代謝測量分析系統中，并分別加入蘋果酸、辛酰肉堿、ADP、谷氨酸、琥珀酸、魚藤酮、丙二酸、粘噻唑、以及抗霉素等，觀察細胞的耗氧情況。紅色曲線為樣本 A，綠色曲線為樣本 B，實驗數據顯示不同量樣本加入相同劑量的藥物后耗氧率基本相同。
應用演示：
測量細胞為小鼠骨髓癌細胞。實驗中使用TIP 2k 微型滴定泵加入解耦聯劑 FCCP，實驗設定滴定間隔 120 秒，循環滴定 15 次，每次逐量增加 0.5uM，加藥濃度從0.5uM-7.5uM。耗氧率隨解耦聯劑 FCCP的不同濃度的變化而不同；O2含量逐步下降。
應用演示：
實驗為測量大鼠腦部線粒體的耗氧率與 H2O2之間的相互作用。實驗中分別添加丙酮酸、谷氨酸、ADP、琥鉑酸、魚藤酮、寡霉素、FCCP、抗霉素等，實驗結果顯示線粒體在底物型試劑添加過程中其耗氧率隨底物的添加產生變化，而活性氧的變化不明顯。當抑制劑添加之后，明顯可見活性氧產生積累，進而影響好氧率的變化情況。
參考文獻：
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? Mills EL, Ryan DG, Prag HA, Dikovskaya D, et al. Itaconate is an anti-inflammatory metabolite that activates Nrf2 via alkylation of KEAP1. Nature 556:113-7.
? Calcutt NA, Smith DR, Frizzi K, Sabbir MG, et al. Selective antagonism of muscarinic receptors is neuroprotective in peripheral neuropathy. J Clin Invest 127:608-22.
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